注：参考《中国药典2020版》

色谱柱：MagiLab，MA-C18

规    格：4.6×250mm 5μm

波   长：254nm

进样量：5μL   柱   温：43℃

流动相： 以（星可）乙腈-0.1mol/L醋酸钠溶液（用醋酸调节pH值至6.5）（7:93）为流动相A，以（星可）乙腈-水（4:1）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；

对照品溶液的制备  取L-羟脯氨酸对照品、甘氨酸对照品、丙氨酸对照品、L-脯氨酸对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml分别含L-羟脯氨酸80μg、甘氨酸0.16mg、丙氨酸70μg、L-脯氨酸0.12mg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品粗粉约0.25g，精密称定，置25ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液20ml，超声处理（功率500W，频率40kHz）30分钟，放冷，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀。精密量取2ml，置5ml安瓿中，加盐酸2ml，150℃水解1小时，放冷，移至蒸发皿中，用水10ml分次洗涤，洗液并入蒸发皿中，蒸干，残渣加0.1mol/L盐酸溶液溶解，转移至25ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，即得。

衍生化处理  精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各5ml，分别置25ml量瓶中，各加0.1mol/L异硫氢酸苯酯（PITC）的（星可）乙腈溶液2.5ml，lmol/L三乙胺的（星可）乙腈溶液2.5ml，摇匀，室温放置1小时后，加50%（星可）乙腈至刻度，摇匀。取10ml，加（星可）正己烷10ml，振摇，放置10分钟，取下层溶液，滤过，取续滤液，即得。

对照溶液图谱：

样品溶液图谱：

按《中国药典2020版》的方法采用MagiLab，MA-C18测定阿胶中L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的含量，其L-羟脯氨酸理论塔板数＞4000，四种氨基酸且皆具有良好的峰形以及分离度。